做亲子鉴定是怎么样的方法?小编告诉您一般的方法是 用高通量基因测序二代测序仪检测
试验试剂:
l.饱和熏蒸酚:市售AR经酚需在182度用空气凝结管再蒸馏,冷却后加入8一羟基喹啉,浓度达到1g/L,在液体酚中加入等体0.5mlTris-HCL缓冲液(PH8.0),用磁力搅拌15min,提取上层(水层)液体,加入等体积0.lmol/LTris-HCL缓冲液(pH8.0),同样搅拌15min,分相完全后吸入上层液体,最后在酚层(下层)中加入含有1/10体积2g/L基二醇的0.1mol/LTris-HCL缓冲(pH8.0),分装后避光20度保存,至少可使用1个月
二是氧仿。
三、异戊醇。
4.氯仿/异戊醇混合物的比例为24:1或9:1。
①8-1羟基喹啉是黄色化合物,是抗氧化剂。也是酶的一些抑制剂和金属离子的弱结合剂。加入8-1羟基喹啉,酚层变黄,可作为识别标志。
试验操作:
l.样品加入体积和酚或酚/氯仿(1:1)混合物。
二、上下颠倒均匀。
3.室温,12000转/分钟,离心5分钟。如果蛋白质多或边界不清,可以离心10分钟。
4.将上层(水层)吸入另一个新的离心管。
5.添加体积酚/氯仿/异戊酸(25:24:1)溶液。重复步骤2,3,4。
6.添加体积氯仿/异戊酸(24:1)溶液。重复步骤2、3、4。
7.乙醇沉淀核酸(见核酸沉淀纯化)